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pcr实验室遗传病检测

***突变和拷贝数变异是遗传病发生的主要遗传学基础，也是遗传病检测的主要靶标。遗传病的复杂性伴随着***突变数目多、类型广；***拷贝数变异不仅表现为缺失和，而且缺失位置、大小以及倍数都呈现多样性。遗传变异的复杂性为遗传病的临床检测提出了技术挑战。实时PCR技术是我们近发展起来新一代实时PCR技术，利用荧光标记或熔点分析，可以在单个反应管内检测多个靶标。

示例：人Y染色体AZF区微缺失检测。

方法学：荧光PCR法。

用途：本产品用于定性检测男性全血样本中 Y 染色体无症因子。（azoospermia

factor，AZF）区域是否存在缺失，具体检测缺失位点为：AZFa：sY84、sY86；AZFb：sY127、sY134；AZFc：sY254、sY255；AZFd：sY145、sY152。

临床研究表明，Y 染色体 AZF 区（AZFa, AZFb, AZFc,AZFd）不同程度的缺失可导致男性的、无精症或畸形等症状，从而导致。本***盒可辅助诊断确诊患者的病因分析，检测结果仅供临床参考，不能单独用做确诊或排除病例等临床诊断的依据。

标本类型：全血。

检测流程：

（1）样本处理及 DNA 提取（在标本制备区完成）→（2）样本处理及 DNA 提取（在标本制备区完成）→（3）加样（在标本制备区完成）→（4）PCR

扩增（在扩增区完成）→（5）结果分析与判定。

其他同类项目：地贫、、尿症（PKU）、蚕豆病（G6PD）、脊髓型肌萎缩（***A）、进行性肌营养不良（DMD）、（HLA）、血友病。

适合开展的***和：妇幼、第三方、各种级别的有需求的***。

pcr常见辅料的质检

辅料的质检应结合实际工作中可能用到的场景，并非越苛刻越好，需要每个实验室结合自身情况来设计和调整文中提到的参数。

1.离心管

（1）渗漏密闭性：将n个离心管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min，没有墨汁渗出为合格。

（2）离心密闭性：将n个离心管加入半量纯水，放入离心机，10000 rpm，30min，管盖未崩开未漏液为合格。

（3）热密闭性：将n个离心管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入金属浴中，65℃或90℃（巴氏消毒），30min，再进行称重，离心管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。

（4）冷密闭性：将n个离心管加入半量纯水，放入-20℃冰箱，24h，离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。

（5）污染物质检：将n个离心管分别加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置5min，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（6）***物质检：将n个离心管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min，然后进行提取;RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被***为合格。

洁净厂房的噪声源

   ①通风机噪声，净化空调系统中的主要噪声源是通风机。通风机噪声的大小与叶片形式、片数、风量、风压等因素有关。风机噪声是由叶片驱动空气产生的紊流引起的宽频带气流噪声以及相应的旋转噪声所组成，后者可由转数和叶片数确定其噪声频率。为了比较各种风机产生的噪声大小，通常用声功率级表示。

   通风机噪声水平应由制造厂提供，当缺乏完整数据时，可按(7-95)计算其总声功率级Lw (dB):

   Lw2 Lwc+10 lg( QP2)一20(7-95)

公式中  Lwc——通风机的比声功率级，dB（定义为同一系列风机在单位风量。1113 /h，，和单位风压“10Pa”条件下所产生的总声功率级）；

   Q-通风机的风量，I113 /h：

   P-通风机的全压，Pa。

  ②风道系统的气流噪声，风道内气流流速和压力的变化以及对管壁和障碍物的作用而引起的气流噪声。在高速风道中这种噪声不能忽视，而在低速风道内（指风管速度< 8m/s），即使存在气流噪声但与较大的声源相叠加，可以忽略。因而从减少噪声考虑，应尽可能地采用较小的风速。

   a．直风管的气流噪声声功率级Lw (dB)，可按式(7-98)确定：

   Lw =10+50 lg口+10 lgF    (7-98)

公式中  w——为风道内流速，m/s；

   F-风道的截面积，mL。

   b．分支管的气流噪声声功率级Lw (dB)可按式(7-99)计算：

   Lw= LNS+ 10 lg,+30 lgDb+ 50 lgvb  (dB)    (7-99)

公式中L NS-标准声功率，dB（与倍频程频率、分支管直径、分支管风速Vb有关）。

   ，——倍频程频率，Hz;

   Db-一支管直径，m；

   V——支管风速，m/s。

   冷水机组的噪声，我国JB/T 4329-1997及JB/T 3355-1998规定，螺杆式冷水机组及离心式冷水机组，应进行噪声声压级测量，并在样本中提供噪声值。当机组噪声值超过有关***噪声限值时，应对机组进行隔声处理，其噪声声压级按处理后的测试值评估。